生物学探究的“超等神器”欧美色图 亚洲色图
作念分子生物学践诺的时期,有莫得外传过“双荧光素酶证明系统”?这但是频年来超火的探究用具,能帮你糟塌措置基因调控、miRNA功能考据,致使药物筛选!
🌟一、双荧光素酶证明系统是个啥? 简便来说,双荧光素酶证明系统即是一种超狠恶的践诺时期,它期骗两种荧光素酶(萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶)来检测基因抒发和调控元件的活性。
🌟二、它的旨趣超简便! 荧光素酶响应 萤火虫荧光素酶:在ATP、镁离子等条目下,催化荧光素氧化,发出黄绿色荧光 海肾荧光素酶:催化腔肠素与氧气响应,发出蓝色荧光 这两种荧光素酶发出的光不错通过仪器检测到,况兼它们的发光强度和基因抒发水平是成正比的哦 证明基因的应用 把感酷爱的基因调控元件(比如运转子、增强子)和荧光素酶基因拼接在一说念,构建成证明基因载体。当细胞里的调控元件被激活时欧美色图 亚洲色图,人与动物荧光素酶基因就会抒发,发出荧光。
张开剩余61%🌟三、系统构成:践诺的“装备库” Arsenal 检测试剂 萤火虫荧光素酶检测试剂:包含荧光素、ATP、镁离子等,能检测到萤火虫荧光素酶发出的光。 海肾荧光素酶检测试剂:含有腔肠素,用于检测海肾荧光素酶的活性。 这些试剂就像是“荧光探伤器”,能精确地捕捉到荧光素酶发出的光信号! 证明基因载体 萤火虫荧光素酶载体:把主义基因的运转子区域克隆到荧光素酶基因前边,构建成重组载体。 海肾荧光素酶载体:常常含有踏实的运转子(如SV40),用于翻新践诺裂缝。 这两种载体就像是“荧光探针”,匡助咱们精确地检测基因调控的变化!
熟女人妻网🌟四、主要应用:践诺界的“多面手” 基因转录调控探究 思知说念某个基因的运转子是否被激活?把运转子区域克隆到荧光素酶基因前边,转染细胞后检测荧光强度,就能知说念运转子的活性啦! miRNA功能探究 miRNA是不是的确能调控某个基因?把基因的3'UTR区域克隆到荧光素酶基因后头,若是miRNA能集结,荧光就会数落,这就诠释miRNA起作用啦! 药物研发 思筛选能调控基因抒发的药物?用双荧光素酶证明系统,加入药物后不雅察荧光变化,就能快速找到主义药物,几乎不要太便捷!
🌟五、践诺历程:糟塌上手的“操作指南” 细胞转染 把构建好的萤火虫荧光素酶载体和海肾荧光素酶载体共转染到细胞里 培养与教导 转染后的细胞在相宜条目下培养,让荧光素酶基因抒发 荧光检测 先加入萤火虫荧光素酶检测试剂,检测黄绿色荧光;再加入海肾荧光素酶检测试剂,检测蓝色荧光。
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